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                  現(xiàn)貨人UL16結合蛋白-2ELISA檢測試劑盒的試驗方法

                  發(fā)布時間: 2012-12-28  點擊次數(shù): 926次

                   

                  上海研域網絡有限公司專業(yè)供應各種屬ELISA試劑盒,金標試劑盒,細胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清,提供免費代測服務,保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質量100%保證,若存在質量問題,我們無條件包退換。

                  人UL16結合蛋白-2ELISA檢測試劑盒

                  試驗原理:
                      ULBP-2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知ULBP-2濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將ULBP-2和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中ULBP-2的濃度呈比例關系。

                  自備材料
                  蒸餾水。
                  加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
                  振蕩器及磁力攪拌器等。

                  安全性
                  避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
                  實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
                  不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

                  人UL16結合蛋白-2ELISA檢測試劑盒

                  操作注意事項
                  試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
                  實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
                  不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
                  使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
                  使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
                  洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
                  底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
                  加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
                  按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

                  人UL16結合蛋白-2ELISA檢測試劑盒

                  樣品收集、處理及保存方法
                  血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
                  血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
                  細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
                  組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
                  保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

                  人UL16結合蛋白-2ELISA檢測試劑盒

                  操作步驟
                  使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
                  根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
                  加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
                  甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
                  每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
                  甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
                  每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
                  取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
                  在450nm波長處測定各孔的OD值。

                  局限
                  6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。

                  試劑盒性能
                  1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
                  2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
                  3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。

                  人UL16結合蛋白-2ELISA檢測試劑盒

                  結 果 判 斷 與 分 析
                  1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
                  2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的ULBP-2標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的ULBP-2含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
                  3、檢測值范圍:0-800U/ml
                  4、敏感度: 1.0 U/mlPSD-95 突觸后密度蛋白95抗體 0.1ml
                  PSD-95 突觸后密度蛋白95抗體 0.2ml
                  PSGL-1/CD162(P-selectin glycoprotein ligand 1) P選擇素糖蛋白配體1抗體 0.2ml
                  Goat anti-human IgG/FITC 熒光素標記羊抗人IgG 0.3ml
                  Goat anti-human IgM/FITC 熒光素標記羊抗人IgM 0.3ml
                  PSMD9/Bridge-1(proteasome modulator 9) 蛋白酶調解因子9 0.2ml
                  P-selectin/CD62p P選擇素抗體 0.1ml
                  P-selectin/CD62p P選擇素抗體 0.2ml
                  L-Selectin/CD62L (ELAM-1) L選擇素抗體 0.1ml
                  L-Selectin/CD62L (ELAM-1) L選擇素抗體 0.2ml若需要了解試劑盒的詳細信息,詳情:謝明: 

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