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                  猴子β防御素(β-DF)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒

                  發(fā)布時間: 2019/11/29  點擊次數(shù): 1109次
                  提 供 商: 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 資料大小:
                  圖片類型: 下載次數(shù): 178
                  資料類型: DOC 瀏覽次數(shù): 1109
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                  猴子β防御素(β-DF)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒
                  本試劑盒僅供研究使用。
                  使用目的:本試劑盒用于測定猴子血清,血漿及相關(guān)液體樣本中β防御素(β-DF)的含量。
                  實驗原理
                  本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競爭法測定標(biāo)本中猴子β防御素(β-DF)水平。用純化的猴子β防御素(β-DF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入β防御素(β-DF),和HRP標(biāo)記的β防御素(β-DF)抗原,使它們競爭結(jié)合,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的β防御素(β-DF)的含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中猴子β防御素(β-DF)的含量。  
                  試劑盒組成 

                  猴子β防御素(β-DF)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒標(biāo)本要求 
                  1.標(biāo)本處理:(1)水樣   采集后經(jīng) -20℃反復(fù)凍融三次,再經(jīng)玻璃纖維過濾后,備查
                  (2)組織   樣品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,或按相關(guān)文獻(xiàn)提取進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,備查
                  2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
                  操作步驟
                  1.加樣:分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)孔中加50微升,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

                  2.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
                  3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。   
                  4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
                  5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
                  6.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
                  7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn))。
                  8.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

                  計算
                    以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 
                  猴子β防御素(β-DF)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒注意事項
                  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
                  2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
                  3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
                  4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
                  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
                  6.底物請避光保存。
                  7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
                  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
                  9.本試劑不同批號組分不得混用。
                  檢測范圍:
                  8.0 pg/ml -240 pg/ml
                  規(guī)格:
                  96人份/盒
                  保存條件及有效期
                  1.試劑盒保存:2-8℃。
                  2.有效期:6個月

                產(chǎn)品中心 Products
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