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                  多聚螯合物酶法--通用免疫酶復(fù)合物 (UIP)法

                  發(fā)布時(shí)間: 2011/11/22  點(diǎn)擊次數(shù): 1262次
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                  多聚螯合物酶法--通用免疫酶復(fù)合物 (UIP)法

                  長(zhǎng)期以來,許多的研究者希望IHC方法更敏感、更穩(wěn)定、更簡(jiǎn)單,要求多步檢測(cè)系統(tǒng)簡(jiǎn)化,但敏感性要進(jìn)一步提高,使這一技術(shù)面臨巨大的挑戰(zhàn)。在實(shí)踐中,往往是步驟減少了,敏感性也降低,這是一對(duì)矛盾。為了克服這一矛盾,為此嘗試了許多辦法,如催化信號(hào)放大系統(tǒng)(CSA)、免疫PCR、末端產(chǎn)物放大技術(shù)等方法,其敏感性增加了,但伴隨而來的高非特異性背景染色使應(yīng)用者難接受。

                  一種新的多聚螯合物酶二步法在1995年被隆重推出,該方法與簡(jiǎn)單的二步法相比較,具有很高的敏感性、穩(wěn)定性和特異性。目前,多聚螯合物酶法也稱非生物素檢測(cè)系統(tǒng),有三種不同物質(zhì)設(shè)計(jì)的多聚螯合物,它們是以碳為骨架(C—C—C—C—C—C—C一)的多聚螯合,主要構(gòu)成EnVision法的EnVision試劑。它的主要缺點(diǎn)是不易折疊,相對(duì)分子質(zhì)量大,形成空間障礙,使穿透細(xì)胞或核膜能力下降,影響到方法的敏感性,并常出現(xiàn)組織染色不均一。另一種是以多聚糖為骨架的多聚螯合物,主要用于PowerVision法,它可以折疊,使酶和抗體分子呈串珠樣緊密排列,其復(fù)合物顆粒小于EnVision試劑,其敏感性好于En—Vision法。第三種是以氨基酸類為骨架的多聚螯合物,主要用于UIP(universal immu—noperoxidasepolymer)法,其敏感性基本與PowerVision法相同。其缺點(diǎn)是多聚物中有N末端暴露,形成的電荷能和組織細(xì)胞發(fā)生靜電吸附,可造成非特異性染色,染色時(shí)需平衡靜電荷。

                  UIP(universalimmuno—enzymepolymer)法,即通用免疫酶復(fù)合物法,是Nkhirei發(fā)明的一種新型免疫組化染色方法。其基本原理及工作流程與EnVision法相似,不同的是UIP復(fù)合物為HRP—氨基酸—抗鼠或抗兔IgG復(fù)合物(N—Histofine復(fù)合物)。因N—Histofine復(fù)合物相對(duì)分子質(zhì)量較EnVision復(fù)合物相對(duì)分子質(zhì)量稍小,理論上具有更強(qiáng)的穿透力。
                  多聚螯合物酶法--通用免疫酶復(fù)合物 (UIP)法
                   

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