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                  現(xiàn)貨人單核細(xì)胞趨化蛋白-1ELISA檢測(cè)試劑盒

                  發(fā)布時(shí)間: 2012/12/26  點(diǎn)擊次數(shù): 548次
                  提 供 商: 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 資料大小:
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                  資料類型: JPG 瀏覽次數(shù): 548
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                  人單核細(xì)胞趨化蛋白-1ELISA檢測(cè)試劑盒

                  試驗(yàn)原理:
                     MCP-1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知MCP-1濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將MCP-1和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中MCP-1的濃度呈比例關(guān)系。

                  自備材料:

                  蒸餾水。
                  加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
                  振蕩器及磁力攪拌器等。

                  人單核細(xì)胞趨化蛋白-1ELISA檢測(cè)試劑盒

                  樣品收集、處理及保存方法:

                  血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
                    
                  血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
                  細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。
                  組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
                  保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

                  人單核細(xì)胞趨化蛋白-1ELISA檢測(cè)試劑盒

                  操作注意事項(xiàng):

                  試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
                  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
                  不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
                  使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
                  使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
                  底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
                  加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
                  按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

                  安全性:

                  避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
                  實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
                  不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

                  人單核細(xì)胞趨化蛋白-1ELISA檢測(cè)試劑盒

                  操作步驟:

                  使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
                  根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
                  加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
                  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
                  每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
                  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
                  每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。
                  取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
                  在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

                  人單核細(xì)胞趨化蛋白-1ELISA檢測(cè)試劑盒

                  結(jié) 果 判 斷 與 分 析:

                  1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
                  2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的MCP-1標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的MCP-1含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度, 再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
                  3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml
                  4、敏感度: 1.0 pg/ml
                  PGE2(Prostaglandin E synthase 2) 前列腺素E2抗體 0.2ml
                  PTGEs(Prostaglandin E synthase) 前列腺素E合成酶抗體 0.2ml
                  PTHrP/PTHLH 甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
                  Goat anti-rat IgM/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗大鼠IgM 0.3ml
                  Goat anti-Guinea IgG/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗豚鼠IgG 0.3ml
                  PTN(pleiotrophin) 多效生長(zhǎng)因子抗體 0.2ml

                  若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,詳情請(qǐng):謝明: 

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